PRÁCTICA 7: Tinción y recuento de reticulocitos

Objetivo: Realizar una tinción y recuento de reticulocitos.

Fundamento: Los reticulocitos son eritrocitos inmaduros que contienen un retículo o red de cromatina formada por restos de ARN, mitocondrias y otros orgánulos celulares. Su cantidad en sangre periférica es un reflejo de la actividad eritropoyética medular.

La tinción de reticulocitos se realiza a base de colorantes vitales, como azul de metileno nuevo o azul de cresil brillante, estos colorantes dan lugar a la precipitación de los restos de ARN y se observan como filamentos de color azul intenso en el interior de la célula.

Según el grado de maduración que posea el reticulocito presentará forma de ovillo denso en el caso de los más inmaduros o de gránulos escasos para los maduros. Se clasifican en cuatro grupos distintos:

Materiales: Papel de filtro, frasco lavador, portaobjetos, tubos de ensayo, gradilla, pipeta Pasteur, chupetina, lanceta, gasas, papel parafilm, vaso de precipitado.

Reactivos: Colorante azul de cresil, alcohol, aceite de inmersión.

Equipos: Microscopio y baño María.

Muestra: Sangre fresca capilar.

Procedimiento: 

1. Preparar zona de trabajo y rotular todo.
2. Hacer punción capilar con la lanceta.
3. Hacer una disolución de 3 gotas de sangre y 3 gotas de colorante en el tubo de ensayo, y tapar con papel parafilm.
4. Llevar al baño María 5 minutos a 37ºC.
5. Tras los 5 minutos homogeneizar la mezcla y realizar la extensión, dejar secar al aire.
6. Lectura de los resultados al microscopio.

Resultados: solo hemos podido hacer el recuento de 3 campos en dos muestras:

-Valores normales en adultos y niños: 0,5-2 % .

-Valores bajos: Indica anemia ferropénica y aplasia celular (reticulopenias).

-valores altos: anemias hemolíticas (reticulocitosis).

%Reticulocitos= nº reticulocitos contados/nº de hematíes contados x100.

-1ºMuestra:

%Reticulocitos= 6 /538 x100= 1,11% de reticulocitos

-2ºMuestra:

%Reticulocitos= 7/570 x100= 1,22% de reticulocitos

-Observamos que el valor obtenido en ambas muestras, se encuentra entre los valores óptimos, es un paciente libre de anemias.

Gestión de residuos:

-Contenedor amarillo/cortopunzantes: lancetas.

-Contenedor biológicos: pipeta Pasteur y capilares con restos de sangre.

-Contenedor químicos: restos de colorante de la mezcla de azul de cresil.

👉Cuestiones:

1. ¿Qué son los reticulocitos? son hematíes inmaduros que contienen restos de ARN.
2. ¿Qué tipo de tinción estamos utilizando? Tinción vital.
3. ¿Por qué hacemos la corrección del porcentaje de reticulocitos? para descartar errores en la técnica y obtener un resultado más fiable.
4. ¿Qué nos expresa el IRP? índice de producción reticulocitaria. Nos indica que hay una hiper producción de reticulocitos provocada por anemias muy intensas.