PRÁCTICA 6: Separación de fases por centrifugación
Objetivo: Realizar la separación por fases de los componentes de la sangre.
Fundamento: Si centrifugamos sangre con un anticoagulante podemos obtener una separación de sus componentes en tres fases principales:
-En el fondo se encuentran los hematíes.
-En la zona central, por encima de ellos, se encuentran los leucocitos y las plaquetas como una fina capa, también llamada Buffycoat.
-En la zona superior se encuentra el plasma, es la capa más líquida.
Materiales: papel filtro, tubos de ensayo, gradilla, papel parafilm, pipeta Pasteur.
Equipos: Centrifugadora.
Muestra: Sangre venosa.
Procedimiento:
- Preparamos la zona de trabajo y rotulamos.
- Homogeneizamos la muestra de sangre y llenamos otro tubo de ensayo con 3/4 la sangre.
- Tapamos con Parafilm.
- Llevamos a la centrifugadora 1500 rpm durante 30 minutos.
Resultados: Tras la centrifugación observamos las tres capas de los elementos de la sangre bien distinguidos, la Buffycoat es demasiado fina e irregular.
Gestión de residuos:
-Contenedor biológicos: Pipeta pasteur con restos de sangre.
👉Cuestiones:
- ¿Por qué se separan las células en distintas capas al someterlas a centrifugación? se separan por sedimentación, los hematíes pesan más y cuando centrifugamos precipitan.
- ¿Cuántas capas obtenemos con esta técnica? Tres capas: plasma, Buffycoat y glóbulos rojos.
- ¿En qué fase están incluidas las plaquetas? En la capa leuco plaquetaria.
- ¿Cómo es el plasma obtenido? es pobre en plaquetas.
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