PRÁCTICA 14: Determinación de Protombina (PT)

Objetivo: Determinación cuantitativa del tiempo de la Protrombina.

Fundamento: La medida del tiempo de la PT, se realiza para la evaluación de la vía intrínseca de la coagulación. Se usa para el control de la terapia anticoagulante oral en plasma humano citratado.

Materiales: Papel filtro, micropipeta (10-100  y 200 microlitros) y puntas, mosca, tubos de coagulómetro, pipeta graduada y auxiliar, vaso de precipitado.

Equipos: Coagulómetro y centrifugadora.

Reactivos: R PT(tromboplastina de cerebro de conejo, cloruro potásico, inhibidor de heparina, tampón y conservantes).

Muestra: Plasma.

Procedimiento: 

1. Preparar los materiales y la zona de trabajo.
2. Encender el coagulómetro y poner el programa PT, para atemperarlo a 37 ºC, y mezclar los reactivos sin agitarlos.
3. Reconstruir el reactivo: añadir un vial de 4ml o 2 ml dependiendo de la referencia del fabricante.
4. Calentar la muestra y el reactivo menos de 10 minutos.
5. Preparar la cubeta (200 microlitros de R PT y 100 microlitros de plasma + mosca).
6. Empezar a contar el el tiempo de transcurrido en el momento de la mezcla.
7. Detener en el momento de formación del coágulo o en el coagulómetro cuando se haya detenido el tiempo. Obtenemos un tiempo de 24,4 segundos.

Resultados: 

-Valores normales: 11,1-14,3 segundos.

• Hemos obtenido un valor superior (24,4 segundos), puede aparecer en casos de alteraciones por fármacos.

Necesitamos conocer el tiempo del plasma normal (%pool) en segundos para calcular los valores. Para ello utilizamos el control +  (12,3 segundos) del mismo laboratorio del kit comercial que hemos utilizado para realizar el PT. 

Tasa internacional normalizada INR:  PT del paciente en segundos / PT control +  (elevado al ISI= 1,22).

-INR: 24,4 segundos/12,3 segundos = 1,98(elevado a 1,22).